г.Москва
на сайт ВНИИЗЖ
На протяжении многих десятилетий при диагностике бактериальных, вирусных, некоторых протозойных и гельминтозных заболеваний применяются различные иммунологические реакции. Из них можно выделить: реакцию связывания комплемента (РСК), реакцию иммунной флюоресценции (РИФ), иммуноферментный анализ (ИФА) и другие. Но специфичность данных методов невысокая и может выдавать ложноположительные результаты, которые зачастую приходится подтверждать еще и другими методами.
Существенный прорыв в лабораторной диагностике был сделан в 1893 году американским биохимиком Кери Муллисом. Он изобрел полимеразную цепную реакцию (ПЦР), за что был удостоен Нобелевской премии.
В разнообразии методов лабораторной диагностики заболеваний метод ПЦР сегодня считается самым современным и точным благодаря высокой чувствительности и специфичности. Для многих инфекций стал «золотым стандартом». ПЦР очень чувствительна в определении возбудителей таких инфекций как хламидиоз, микоплазмоз, инфекционный ринотрахеит, африканская чума свиней, грипп птиц, чума плотоядных и других.
В настоящее время внедрена новая технология ПЦР - ПЦР в реальном времени – лабораторный метод в молекулярной биологии, который позволяет добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК/РНК) в биологическом материале (пробе). Суть метода — амплификация, увеличение числа копий строго определенных фрагментов молекулы ДНК «in vitro». ПЦР позволяет найти в исследуемом материале небольшой участок генетической информации, заключенный в специфической последовательности нуклеотидов ДНК любого организма среди множества других участков ДНК. Процедура очень похожа на процедуру классической ПЦР. В ней присутствуют все стадии реакции — плавление или денатурация двухцепочечных ДНК при температуре 95˚C, отжиг праймеров (температура отжига зависит от используемых праймеров) и элонгация (удлинение).
ПЦР в реальном времени широко используется для решения многих исследовательских задач в ФГБУ ЦНМВЛ. Также этот метод нашёл применение в диагностики инфекционных заболеваний, диагностики онкологических заболеваний, патогенов в пище и ГМО. Метод так же используется в экологии, криминалистике, фармакологии и других сферах.
Преимущество ПЦР:
- Высокая чувствительность
- Снижение риска контаминации и ошибок при анализе результатов
- Упрощение требований к организации ПЦР-лаборатории
- Регистрация и учет данных в электронном формате
- Возможность количественной оценки исходной ДНК матрицы
- Универсальность метода ПЦР
- Экономия времени Отметим, что в ФГБУ ЦНМВЛ методика ПЦР активно используется с 1997 года.
